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生物缓冲液的配置及保存方法
发布时间:2019-08-06   点击次数:211次
   PBS是磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline)一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。它是生物化学研究中使用最为广泛的一种生物缓冲液,主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4它们有二级解离,缓冲的pH值范围很广;而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供双价阳离子。

  PBS是磷酸缓冲盐溶液的简称,不仅伪狂犬病毒要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。

  原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应,所以使用PBS是。

  PBS也不是万能的,有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高,就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分,维持的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性。

  生物缓冲液的配制方法

  1.含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:

  2.称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),(KCl),吐温-20 ,加水。

  3。PBS:Phosphate Buffered Saline

  4。PBS 1L配方pH7。4:

  5。磷酸二氢钾(KH2PO4):0。24g,

  6.磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.44g,

  7.氯化钠(NaCl):8g,

  8.(KCl):0.2g,

  9.加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L

  保存方法

  加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L。高温高压灭菌后置于4摄氏度冰箱保存待用。

  PBS缓冲液(pH7.2~7.4):

  KH2PO42mM

  Na2HPO4 8mM

  NaCl 136mM

  KCL 2.6mM

  PBS缓冲液一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用,具体试剂一般也有不同的比例配方,在针对性上就有了更好的效果。

  1x PBS缓冲液就是0.01M的磷酸盐缓冲液,可直接使用。2x PBS就是2倍浓度,使用时稀释一倍使用。0.1M的PBS一般不用来配置缓冲液,用于其它用处。

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