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吖啶橙染色液(1mg/ml)
发布时间:2016-04-27   点击次数:777次

产品简介:

属于三环杂芳香燃料,可以标记DNARNA,属于异染性荧光染料。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNARNA染色。因此AO常用于细胞内DNARNA进行检测。AO不核酸结合方式主要有:1、插入性结合,AO嵌入核酸双链的碱基对之间,这种结合方式主要为AO DNA的结合,其荧光发射峰为530nm,激发后呈绿色荧光;2、静电吸引,带正电荷的AO与单链核酸的磷酸根(带负电荷)产生静电间的吸引结合,这种结合方式主要为AORNA的结合,其荧光发射峰为640nm,激发后呈红色荧光,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。因此,嵌合到双链DNA分子中显绿色,与DNA单链或RNA结合时发桔黄色或橙红色荧光。

NobleRyder为储存液,使用时应稀释到合适浓度后使用。染色后在荧光显微镜下观察,可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。使其染上致密浓染的黄绿色荧光或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。常与EB染色合用双染,因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

产品组成

名称/编号

D0836

Storage

10ml

4 避光

使用说明书

1

 

 

自备材料:

1、荧光显微镜

2、低速离心机

3PBS

4、细胞计数板

5、载玻片、盖玻片

 

操作步骤(仅供参考)

1、收集细胞(采用流式细胞仪检测时,应先固定细胞),用PBS清洗细胞1次,计数并调节细胞浓度至106/ml

2、取适量的细胞悬液,加入,使AO终浓度为8.517μg/ml,轻轻混匀。

3、室温避光染色1520min,滴加于载玻片上并加盖玻片或上流式细胞仪分析。

4、荧光显微镜下观察(激发滤光片波长488nm,阻断滤光片波长515nm),计数并拍照。

 

染色结果:

正常细胞

细胞被均匀染成黄绿色荧光

凋亡细胞

染色质浓缩,细胞核碎裂成点状,被

染成大小不一、致密浓染的绿色颗粒

注意事项:

1不含破膜剂,较少单独使用。

2、常与EB染色合用,可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

3、如有低温离心机进行离心效果更佳。

4、操作过程中应注意减少试剂暴露于强光下的时间。

5、试剂有一定毒性,请小心操作。

6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

有效期:6个月有效。

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