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QIAGEN试剂盒试验过程关键性的四步骤
发布时间:2015-12-14   点击次数:711次
   QIAGEN试剂盒操作过程看似简单,但稍不注意都会影响到试验效果,QIAGEN试剂盒在试验过程中,关键的步骤有哪些呢?小编为您揭晓。

  一、重要的洗涤

  不充分的洗涤会导致差异和高背景,从而带来不理想的实验结果。如果未结合的材料残留在微孔板中,那么它会增加背景噪音。有必要的话,可增加洗涤液中的盐浓度,这会阻止非特异结合反应。如果背景过高,怀疑洗涤不够时,可以尝试增加洗涤次数。

  二、QIAGEN试剂盒检测试剂要适量

  切勿使用过多的QIAGEN试剂盒。如果浓度过高,或者未正确稀释,则会导致高背景。也不要显色过度,如有必要,优化一下何时应加入终止液。

  三、抗体浓度须优化

  如果试剂稍有不同,则可能需要优化抗体的量。非特异的抗体结合会增加背景。为了防止这一点,切勿使用过多的一抗或二抗。

  四、关键的封闭

  封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。如果背景过高,怀疑封闭不充分,那么可以尝试使用更高浓度的封闭液,或适当延长封闭时间。

  目前主要有两种类型的封闭液:蛋白和非离子型去污剂。使用的类型须取决于多个因素,包括微孔板的表面试剂、吸附的抗原、抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合,但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。

  保证以上四个步骤不出错,可以让QIAGEN试剂盒发挥zui好的作用。

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