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了解一下什么是Miracloth滤布吧
发布时间:2020-04-20   点击次数:27次
  基因工程转化真菌和一些土壤细菌时,往往需要先消化掉厚厚的细胞壁,制备分离原生质体以便进行转化,即使是大家很熟悉的酵母转化,当简便的醋酸锂方法不起作用时,zui原始也是zui有效方法还是原生质体转化。
 
  当经过消化处理的菌体混合液经过Miracloth滤布过滤后,就可以去掉未被消化完全的菌体和杂质,分离得到的“裸露的"原生质体就可以准备进行转化或者电转了。如果没有这一步的分离,未完全消化的菌体由于生长迅速,会严重干扰结果。
 
  植物基因组纯化相对比较麻烦一点,市面上有不少试剂盒可供选择,多数纯化基因组DNA的试剂盒采用快速离心方法,其纯化产物大小仅为50kb左右。你可能没有想到,一种改良的Miracloth滤布快速纯化方法是另一种经济有效的选择:通过液氮研磨得到的组织经过裂解液处理,温浴、醋酸钾冰浴复性,用Miracloth过滤,得到的滤液可以直接用异丙醇沉淀。这个方法改良于玉米基因组纯化,特别适合各种植物组织DNA的纯化。zui大的优点是快速经济实用,不需要昂贵的试剂盒或者试剂,整个方法就像用试剂盒一样简单。
 
  如果需要植物组织的高分子量基因组就不宜采用试剂盒。Miracloth是另外一个好选择--植物组织匀浆后直接用Miracloth过滤就可以得到含有细胞核的溶液,离心沉淀细胞核,后继的高分子量基因组抽提就简单易行了。此外,这个方法还可以用于制备研究转录因子所用的细胞核抽提物(Cell Nucleic Extract),甚至分离纯化线粒体DNA、细胞膜等等。
 
  其实Miracloth就是简单的一种微孔滤膜,比干酪布好用得多。只要你想得到,就有比产品说明书更广泛而有趣的用途。比如有人用在植物真菌培养,甚至还有人用在抗体细胞培养中。聪明的你是不是也能想到其他用途?只要有创意,这不起眼的小东西一样可以在实验室中发挥重要作用哟。
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