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abcam抗体到货快,如何保存有讲究
发布时间:2016-09-26   点击次数:2150次
   abcam抗体到货快是abcam抗体一大特点,也是明显优势。abcam抗体保存是否得当,直接决定了抗体的活性和使用效果。本文将介绍下abcam抗体的保存以及相关信息。

  对于大部分abcam抗体,比较合适的保存方式是分装后保存在 -20℃ or-80℃ 。对绝大多数抗体来说,保存在-20℃是完全足够了。没有任何证据显示保存在-80℃会有更多的好处!

  分装可以zui大程度的降低反复冻融对抗体活性的损害,同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体造成的污染可能性。分装的量以一次实验用完为好,zui少不能少于10ul每份。因为分装体积越小,抗体的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响。

  复融后的分装抗体如果一次用不完,将剩余母液保存在4℃,避免再冻起来!抗体工作液应该当天配制当天用完,在4℃ 尽量不要超过1天。避免将abcam抗体保存在自动除霜冰箱中。尽量将抗体保存在冰箱里层,而不是门上。

  关于abcam抗体加入一些试剂或其他溶剂的介绍。

  关于加入甘油保存:

  有些人会加50%的甘油到abcam抗体中来避免反复冻融,甘油在-20℃会降低冰点。这对很多抗体可能是可行的。但是abcam仅对非常小的一部分抗体检测过其在这种条件下的稳定性;而Abcam只对按照推荐条件保存的抗体提供质量保证!加入甘油的溶液不建议在-80℃保存,因为这已经超过了甘油的冰点。如果您要加入甘油来保存抗体的话,请谨慎注意无菌操作,避免污染!

  关于蛋白保护剂:

  蛋白在高浓度时更不容易降解(1mg/ml或者更高),这就是为什么在abcam抗体中加入BSA之类作为稳定剂的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以减少抗体由于管壁吸附所造成的损失。但是如果抗体要用来标记的话,则不能加入蛋白稳定剂,因为这些稳定剂会和抗体一起竞争结合标记物。

  关于叠氮化钠(sodiumazide)的使用:

  为了防止微生物污染,叠氮化钠经常被加入到抗体中(终浓度0.02%(w/v))。很多abcam抗体已经含有了0.02%-0.05%的叠氮化钠,在说明书的“Storage buffer”中有标明的。

  在下述情况中不能使用叠氮化钠:

  如果抗体用于染色或处理活细胞,用于体内研究。叠氮化钠在抵抗微生物的同时,对其它大部分有机物也是有毒的,因为它阻断了线粒体的cytochromeelectron transport system。

  要偶联带有氨基基团的抗体:叠氮化钠会干扰任何含有氨基基团的偶联,因此在进行偶联之前,应将叠氮化钠去除。偶联后的抗体可以加入叠氮化钠保存,但是浓度只能是0.01%。对于需要偶联的抗体,thimerosal(merthiolate)可以替代叠氮化钠作为保护剂!

  注意:叠氮化钠的去除方式,可以通过凝胶电泳或过滤的方式去除!IgG的分子量是150kDa(IgM 是~ 600kDa); 叠氮化钠的分子量只有65Da。使用cut off 14kDa的滤膜即可将叠氮化钠从抗体中去除。

  abcam抗体如何保存是有讲究的,希望以上内容可以给大家一些参考。

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